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                        實驗室之高效液相色譜儀操作步驟

                        點擊次數:2770 發布時間:2012-03-07
                         
                        高效液相色譜儀操作步驟:

                            1).過濾流動相,根據需要選擇不同的濾膜。

                            2).對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

                            3).打開HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統。

                            4).進入HPLC控制界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。

                            5).有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,需要在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖洗時速度不要超過10ml/min。

                            6).調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。點擊injure,選用合適的流速,點擊on,走基線,觀察基線的情況。

                            7).設計走樣方法。點擊file,選取selectusersandmethods,可以選取現有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點擊newmethod。選取需要的配件,包括進樣閥,泵,檢測器等,根據需要而不同。選完后,點擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括:a.進樣前的穩流,一般2-5分鐘;b.基線歸零;c.進樣閥的loading-inject轉換;d.走樣時間,隨不同的樣品而不同。

                            8).進樣和進樣后操作。選定走樣方法,點擊start。進樣,所有的樣品均需過濾。方法走完后,點擊postrun,可記錄數據和做標記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。

                            9).關機時,先關計算機,再關液相色譜。

                            10).填寫登記本,由負責人簽字。

                            注意事項:

                            1).流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。

                            2).柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要讓液體過柱子。

                            3).所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。

                            4).壓力不能太大,最好不要超過2000psi。

                         

                         

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